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2023年7月-11月,工作站联合青海省畜牧兽医科学院动物营养实验室从互助藏香猪、八眉猪、长白山野猪肠道内分离筛选出具有益生性的乳酸菌和酵母菌。选用新鲜粪便,用无菌水进行稀释,在含有0.1 g/L氯霉素的YPD固体培养基中涂布,28℃培养48 h~72 h,挑取不同形态的单菌落,接种于YPD液体培养基中继续培养48 h~72 h用于初步筛选酵母菌;另在含有碳酸钙的MRS固体培养基表面涂布,37℃培养48 h,挑取有明显溶钙圈的单菌落接种至MRS肉汤培养基,37℃恒温培养24 h用于筛选乳酸菌,菌落重复划线,观察菌落形态并记录特征,直至纯化出单一形态菌株。目前初步分离出酵母菌藏香猪16株,八眉猪23株,长白山野猪19株;乳酸菌藏香猪31株,八眉猪21株,长白山野猪24株。以菌株基因组DNA为模板,酵母菌18SrDNA和26SrDNA基因通用引物扩增,乳酸菌16SrRNA基因通用引物扩增,扩增产物经1%的琼脂糖凝胶电泳检测,扩增子送往生物公司进行测序,以鉴定酵母菌和乳酸菌的种属。随后将进行形态学、生理生化、益生特性等鉴定。下一步计划以猪全价料为原料,接种不同比例的菌种进行发酵,并对发酵饲料进行微生物菌群、饲料营养品质和发酵品质的测定。本研究筛选出益生性的乳酸菌和酵母菌,可用于生产优质的益生菌制剂,应用于生物发酵饲料中,在提高饲料品质的同时,不仅促进了动物的健康生长,而且提高了养殖经济效益,对助力我省绿色有机农畜产品输出地建设将发挥积极作用。