王煜伟
2024-10-09 22:38:31
根据 Box-Behnken 中心组合试验设计原理,通过预实验考察脂肪酸提取与衍生的影响因素,确定了萃取时间、萃取次数和料液比,以及衍生温度、衍生时间和EDC的数量为 Box-Behnken 设计的自变量,以峰面积为响应值,设计三因素三水平的响应面实验 (共 17 个试验点,5 个中心点),对脂肪酸提取与衍生条件进行了优化。利用 Design Expert (Trial Version 7.1.6, Stat-Ease Inc., Minneapolis, MN, USA) 软件对获得响应面实验数据进行回归分析,求出数学模型,再对数学模型进行方差分析,对模型的显著性、试验因素的显著性、因素间交互作用的显著性及试验值的可靠性进行了检验,从而确定脂肪酸提取与衍生的最佳条件。
王煜伟
2024-10-09 22:20:23
9月11日,计划以2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪哗(PIA)为柱前荧光标记试剂,建立了快速灵敏的HPLC/FLD-APCI/MS脂肪酸分析方法并能同时检测22种脂肪酸:
1 标准溶液的配制
称取30.95 mg的2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑(PIA), 用0.3 mol/L DMAP定容至10mL,得到浓度为1.0 × 10 −2 mol/L的衍生试剂溶液。准确称取一定质量的脂肪酸标品,用色谱纯乙腈配成浓度为 5.0×10 -3 mol/L 的混合溶液。所有的标准溶液均保存在4℃的冰箱中备用。
2 标准品衍生化
依次加入20µL 脂肪酸混合标准品溶液(5 × 10 −3 mol/L)或提取物溶液,150µL 衍生试剂(5 × 10 −3 mol/L),30µL EDC (0.15 mol/L) 溶液,密封后摇匀,于2 mL安培瓶中,封口后于80℃恒温水浴下反应45min,冷却至室温后,加入乙腈稀释至 600µL,过 0.22µm有机滤膜过滤后进样分析。