祁有朝
2023-08-03 16:12:06
利用KEGG数据库对黑果枸杞和黄果枸杞差异代谢物进行通路分析,BL vs RL中差异代谢物共分布到73条代谢通路,其中具有显著差异的通路有2条(p<0.05),是黄酮生物合成和托烷、哌啶和吡啶生物碱的生物合成,共有22种代谢物参与。其中L-赖氨酸、哌啶、红古豆碱、二氢槲皮素、L-异亮氨酸这几种代谢产物在黄果枸杞中累积较多,杨梅素、柚皮苷、柚皮素查耳酮、根皮苷、柚皮素、新橙皮苷、5-O-对香豆酰奎宁酸、根皮素、根皮苷查耳酮等在黑枸杞中更为活跃。(图见附见)
祁有朝
2023-08-03 16:09:31
基于OPLS-DA结果,根据VIP ≥ 1、FC ≥ 2和FC ≤ 0.5标准筛选出具有显著差异的代谢物,通过火山图表示两种枸杞中代谢物差异水平,并用聚类热图(附件)对差异物质进行分析,结果如图6、7和表2所示。黑果枸杞和黄果枸杞(BL vs YL)中共有487个差异代谢物,占总代谢物的44.11%,包括上调代谢物235个和下调代谢物252个。其中包括51种脂质、4种甾体、23种有机酸、21种萜类、79种生物碱、34种其它类、25种木脂素和香豆素、4种醌类、115种黄酮、11种核苷酸及其衍生物、93种酚酸、27种氨基酸及其衍生物。
对差异代谢物进行log2(FC)排序,筛选出差异倍数前20(上调和下调)的代谢物,结果如表3所示。黄果枸杞和黑果枸杞相比上调的前20差异代谢产物有生物碱5种、黄酮4种、酚酸3种、有机酸2种、其它类2种、木脂素和香豆素1种、醌类1种、萜类1种、脂质1种,其中上调差异倍数最大的代谢物是醛类化合物的4-羟苯基丙烯醛,在黄果枸杞种约为黑果枸杞的5.2×104倍;下调的差异代谢产物中13种黄酮、2种酚酸、2种生物碱、1种萜类、1种氨基酸及其衍生物、1种有机酸,差异倍数最大的是黄酮类的1,8-二羟基-2,6-二甲基-9-蒽酮,在黄果枸杞种约为黑果枸杞的6.4×10-6倍。从表3中可以看出,在黄果枸杞中上调的代谢产物种类较多,主要是生物碱和黄酮,而下调幅度最大的代谢产物主要集中在黄酮。
祁有朝
2023-08-03 16:02:55
如表所示(见附件),两种枸杞中每种成分排名前十的组分中相同代谢产物中黄果枸杞含量较高(≥10%)的有棕榈酸、16-甲基十七烷酸、硬脂酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-7-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-(4''-O-葡萄糖基)鼠李糖苷、1-O-对香豆酰-D-葡萄糖、对香豆酸-4-O-葡萄糖苷、4-O-(3'-O-α-D-吡喃葡萄糖基)咖啡酰奎尼酸、1,3-O-双咖啡酰奎宁酸;相对含量中等(5%-10%)的有α-亚麻酸、γ-亚麻酸、枸杞亚精胺C、枸杞亚精胺H、枸杞亚精胺I、枸杞亚精胺A、苯基丙酸-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4-O-(4'-O-α-D-吡喃葡萄糖基)咖啡酰奎尼酸;含量较少(<5%)的有溶血磷脂酰胆碱18:0、溶血磷脂酰胆碱18:3(2n异构)、溶血磷脂酰胆碱18:3、溶血磷脂酰胆碱16:0、溶血磷脂酰胆碱18:2(2n异构)、甜菜碱、1-甲氧基-吲哚-3-乙酰胺、1H-咪唑并(4,5-D)哒嗪-2-胺、N-阿魏酰酪胺、N-反式-阿魏酸酰对羟基苯乙胺、枸杞亚精胺E、7-甲氧基-3-[1-(3-吡啶基)亚甲基]-4-二氢色原酮、槲皮素-3-O-洋槐糖苷、柽柳黄素-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、3,5,7,4'-四羟基-8-甲氧基黄酮-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷、咖啡酸、水杨酸-2-O-葡萄糖苷、邻苯二甲酸二异丁酯、1-O-阿魏酰-β-D-葡萄糖。
黑果枸杞中相对含量较高(≥10%)的有棕榈醛、16-甲基十七烷酸、硬脂酸、二咖啡酰亚精胺、N1-咖啡酰-N10-二氢咖啡酰亚精胺;相对含量中等(5%-10%)的有α-亚麻酸、γ-亚麻酸、溶血磷脂酰胆碱18:3(2n异构)、溶血磷脂酰胆碱18:3、溶血磷脂酰胆碱18:0、枸杞亚精胺C、枸杞亚精胺B、紫铆素-7-O-葡萄糖苷、柚皮素-4'-O-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-(6''-O-对香豆酰)槐糖苷-7-O-鼠李糖苷、咖啡酸;含量较少(<5%)的有溶血磷脂酰胆碱18:1(2n异构)、溶血磷脂酰胆碱16:0、枸杞亚精胺H、枸杞亚精胺I、甜菜碱、咖啡酰-二氢咖啡酰亚精胺、1-甲氧基-吲哚-3-乙酰胺、N-单肉桂酰基腐胺、槲皮素-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-7-O-芸香糖苷、鼠李素-3-O-芸香糖苷-5-O-鼠李糖苷、7-甲氧基-3-[1-(3-吡啶基)亚甲基]-4-二氢色原酮、异鼠李素-3-O-芸香糖苷-7-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-(4''-O-葡萄糖基)鼠李糖苷、4-对香豆酰鼠李糖基-(1→6)-D-葡萄糖、1-O-咖啡酰-β-D-葡萄糖、香草酸-4-O-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸A、1-O-对香豆酰-β-D-葡萄糖、二氢咖啡酰葡萄糖、丁香醛-4-O-葡萄糖苷、水杨酸-2-O-葡萄糖苷、4-羟基苯甲酸。
祁有朝
2023-08-03 16:01:09
在OPLS-DA得分图中,两种枸杞在第一主成分轴上明显分离,横向距离越远说明两种代谢物之间成分具有差异,图中数据说明两组样本间存在明显差异。根据OPLS-DA模型分析代谢物,用R2X、R2Y、Q2作为模型的预测参数,其中R2X和R2Y分别表示模型对X和Y矩阵的解释率,Q2表示模型的预测能力,这三个指标越接近于1时表示模型越稳定可靠Q2 > 0.5时可认为是有效的模型,Q2 > 0.9时为出色的模型。如图4-B所示,R2X为0.785,R2Y等于1,Q2是0.987,表示模型可靠,且Q2 > 0.9,表明该模型非常出色,可根据其得到的VIP值进行差异代谢物的筛选。(图见附件)