王丽丽 2023-08-03 16:32:51

    所有青稞样品过80目筛。 1.称样:100mg，记录 2.加10mL((PH5)乙酸钠缓冲液)振荡5秒样品管，再加0.1m(未稀释的bottle1.空白加0.1ml缓冲液)，振荡3S。 3.瓶盖微松后放入沸水开始计时，2min拧紧瓶盖并混匀，再过5min,10min各混习5s，15min后(加酶后)停止水浴，混匀放入50℃水浴平衡5min。 4.样品管加入0.1ml未稀释的bottle2，振荡3s，空白管加0.1ml缓冲液。 5.拿至室温下平衡10min。 6.分别取2ml于小离心管在13500rpm下离心5min，然后取上清液1ml于盛有10ml的缓冲液中并混匀。 7.取0.1ml于5ml管中，真加三个葡萄糖标准容液0.1ml，加3mLGOPOD于5ml管50℃水浴中孵育20mim，酶标仪在510nm处测吸光度。 结果显示:所测的31种青稞样品总淀粉含量平均值为55.20%。总淀粉含量在46.05%——60.83%之间。

王丽丽 2023-08-03 16:29:34

    A.淀粉预处理 1.准确称量样品20-25mg，包括参考样品，精确到小数点后一位，于15mL离心管中。 2向离心管中加入1mlDMSO(4)，用漩涡拌器搅拌，瓶盖微松，于沸水浴中直样品完全分散(大约1min)，确保无凝胶状淀粉块。 3.将管置于涡旋混合器上大力混匀，后置于沸水浴中沸水15mn，期间间歇搅拌5(min)。 4.将离心管室温下静置大约5min，加入2mL95%的乙并搅匀，再加入4mL乙醇，倒置混匀，淀粉沉淀会形成，让离心管放置15min。 5.在2000g(3700rpm)下离心5min，弃上清，倒置于纸巾上沥干(10min)。确保乙醇都干了，在随后的直链、支链淀粉的测定中使用该沉淀。 6.加入2mL4)淀粉离心入沸水浴中15m混，确保没有凝胶块7转25m容量用3.反复清洗并定容此为溶液A，溶液配制2h 内完成。 B.支链淀粉-Con A沉淀物和直链淀粉测定 1.取1mL 溶液A至2mL离心管，加入0.5mL的5.，轻轻摇匀，避免泡沫生成。 2.离心管室温放置1h，随后室温下14000g离心10分钟。(有效沉淀支链淀粉时间1h，但超过2h后直链会沉淀) 3.将1mL 上清液转移到 15mL 离心管，加入 3mL 1.使pH 降到 5，混合后于沸水加热5min 使之变性。 4.取出置于40℃水浴中使之平衡5min，加入0.1mL6，在40℃孵育30min,2000g(3700rpm)下离心5min。 5.取1mL上清液加入4mL GOPOD 于 10mL 离心管中，40℃水浴20min，同时培养空白组和葡萄糖对照。(空白组:1.0mL 1.+4mLGOPOD;葡萄糖对照:0.1mL葡标+0.9mL 1.+4mL GOPOD) 6. 510nm 处测吸光度。 C.淀粉总量测定 1.将0.5ml溶液A 与4mL 1混合。 2.加0.1mL 6.，在40℃孵育 10min。 3.取1mL于试管，加入4mLGOPOD混匀，在40℃水浴20min，此孵育与B操作样品同时进行。 计算: 直链淀粉含量计算%=A上清液/A总淀粉x66.8

王丽丽 2023-08-03 16:24:35

    A.淀粉预处理 1.准确称量样品20-25mg，包括参考样品，精确到小数点后一位，于15mL离心管中。 2向离心管中加入1mlDMSO(4)，用漩涡拌器搅拌，瓶盖微松，于沸水浴中直样品完全分散(大约1min)，确保无凝胶状淀粉块。 3.将管置于涡旋混合器上大力混匀，后置于沸水浴中沸水15mn，期间间歇搅拌5(min)。 4.将离心管室温下静置大约5min，加入2mL95%的乙并搅匀，再加入4mL乙醇，倒置混匀，淀粉沉淀会形成，让离心管放置15min。 5.在2000g(3700rpm)下离心5min，弃上清，倒置于纸巾上沥干(10min)。确保乙醇都干了，在随后的直链、支链淀粉的测定中使用该沉淀。 6.加入2mL4)淀粉离心入沸水浴中15m混，确保没有凝胶块7转25m容量用3.反复清洗并定容此为溶液A，溶液配制2h 内完成。 B.支链淀粉-Con A沉淀物和直链淀粉测定 1.取1mL 溶液A至2mL离心管，加入0.5mL的5.，轻轻摇匀，避免泡沫生成。 2.离心管室温放置1h，随后室温下14000g离心10分钟。(有效沉淀支链淀粉时间1h，但超过2h后直链会沉淀) 3.将1mL 上清液转移到 15mL 离心管，加入 3mL 1.使pH 降到 5，混合后于沸水加热5min 使之变性。 4.取出置于40℃水浴中使之平衡5min，加入0.1mL6，在40℃孵育30min,2000g(3700rpm)下离心5min。 5.取1mL上清液加入4mL GOPOD 于 10mL 离心管中，40℃水浴20min，同时培养空白组和葡萄糖对照。(空白组:1.0mL 1.+4mLGOPOD;葡萄糖对照:0.1mL葡标+0.9mL 1.+4mL GOPOD) 6. 510nm 处测吸光度。 C.淀粉总量测定 1.将0.5ml溶液A 与4mL 1混合。 2.加0.1mL 6.，在40℃孵育 10min。 3.取1mL于试管，加入4mLGOPOD混匀，在40℃水浴20min，此孵育与B操作样品同时进行。 计算: 直链淀粉含量计算%=A上清液/A总淀粉x66.8

王丽丽 2023-08-03 16:20:36

    青稞麸皮（2.00 g）依次与9毫升的α-淀粉酶（750 U/mL）、8.2毫升胃蛋白酶（25000 U/mL）和12.5毫升胰酶（800 U/mL）混合，在37摄氏度下模拟胃肠消化。消化后剩余的固体残渣中加入32%的粪便液和培养基，在37摄氏度环境中厌氧发酵0, 2, 6, 12, 24, 36, 48, 60和72小时，研究青稞麸皮中的多酚在体外消化中的释放。 结果显示，胃肠消化释放的多酚含量为319.59 mg/100 g，对于厌氧发酵，多酚含量随着发酵时间的延长，呈现先升高后降低的趋势，其中发酵48小时多酚的含量最高，为399.32 mg/100 g。

王丽丽 2023-08-03 16:19:44

    本实验首先对收集的青稞样品进行除杂处理,利用手持近红外仪对青稞籽粒进行扫描, , 每份样品分别扫描五次并收集光谱图, 建立青稞近红外光谱库, 然后将青稞磨粉、过筛, 处理为统一的青稞样品。对青稞全粉按照标准方法进行化学值检测, 得到的化学检测数据作为近红外检测建模的真值。对于品质模型, 利用谱图处理软件对扫描的图谱进行预处理, 将化学检测值作为真值代入参与建模, 反复修改完善建模参数, 最终建立可靠的青稞定量近红外检测模型。