王光华
2024-10-18 17:54:16
王光华
2024-10-14 09:18:51
采用纸片扩散法进行抗生素敏感性测定,结果判定参照《纸片法抗菌药物敏感试验标准》WS/T 125-1999(表1)。由表2可知,十株菌株对万古霉素、环丙沙星、庆大霉素、氨苄西林均具有敏感性,除菌株YR3.2,其它菌株对利福平具有敏感性。菌株YR3.2、YR2.3、YR4.1对四环素具有耐药性,菌株YR4.1.2、YR2.3B对四环素中度敏感,其余菌株对四环素具有敏感性。菌株YR3.1、YR3.3、YR3.1.2、YR4.3对红霉素具有耐药性,其余菌株对红霉素敏感。菌株YR3.1、YR7.1、YR3.3、YR3.1.2、YR4.3对氯霉素具有中度敏感性,而YR3.2、YR2.3、YR4.1.2、YR2.3B、YR4.1对氯霉素具有敏感性。
王光华
2024-10-14 09:18:13
将酶活力单位(IU)定义为:1 mL 酶液 1 min 内产生 1 μmol 还原糖的酶量作为一个酶活单位。利用 DNS 比色法测定纤维素酶酶活力。分别取 1 mL 粗酶液及溶有 1% CMC-Na 的柠檬酸缓冲液 1.5 mL 依次加入洁净比色管中,在 50 °C恒温水浴锅中保温 30 min,然后迅速向比色管中加入 2.5 mL DNS 溶液并摇匀,促使酶反应终止,混合均匀后沸水浴 5 min,快速冷却后加入超纯水于比色管 10 mL 刻度线处,定容至 10 mL,混匀。在波长为 540 nm 下测定 OD值,以葡萄糖标准曲线求得 CMCA。
取测的重复试验中吸光度的平均值,在葡萄糖标准曲线上计算出其对应的值,根据公式计算出纤维素酶活力(U/mL)。
其中,K 为葡萄糖标准曲线斜率,n 为溶液的稀释倍数,1000 为单位 mg 转化为 μg,180 为 葡萄糖的相对分子质量,t 为显色时间,v 为粗酶液体积。
如图所示,不同菌株酶活性不同,其中菌株YR3.2内切葡聚糖酶酶活最高为54.68U/mL,其次为YR4.1.2、YR2.3、YR2.3B、YR4.1、YR3.1、YR4.3、YR7.1、YR3.3、YR3.1.2,酶活分别为49.38、46.27、44.62、34.75、16.82、14.63、14.45、10.06、8.23U/mL。
王光华
2024-10-14 09:04:22
到五峰镇石湾村遴选八眉猪养殖技术推广示范户,示范户从养殖基础设施、养殖规模等条件进行遴选。
王光华
2024-10-14 08:58:49
1乳酸菌复苏
从-80℃冰箱中取出保种的两株菌:乳肠球菌H49(CCTCC NO:M20232102)、乳酸片球菌HZ49(CCTCC NO:M20232103) ,室温融化后准备复苏;按1%的比例加入到10mL MRS液体培养基中,培养24h后再取其菌液加入到新的10mL MRS液体培养基中培养24h,此步骤共重复三次。接着在MRS固体培养基上进行纯化,在倒好的MRS固体培养基平板上划线培养,24h后观察菌落形态,判断有无污染;根据菌落形态挑取单菌落到10mL的MRS液体培养基中,培养24h,培养步骤同上,重复3次。以上所有步骤培养后都要观察细菌生长情况(培养基浑浊程度,平板有无菌落生长),若细菌生长状况差或未生长则重新取另一管保种的细菌进行复苏。
2涂布稀释、计数
按1%的比例将复苏好的细菌接种到400mL的MRS液体培养基中进行扩大培养,培养24h后,取少量菌液混匀,按105,106,107,108,109的倍数进行梯度稀释,于MRS固体培养基上点样进行活菌计数,点样完成后于37℃培养箱中过夜培养,培养完成后进行计数确定菌液浓度,其余菌液放入4℃冰箱中保存备用。