郭波莉 2024-11-05 15:12:15

    取新鲜酒糟粉，用搅拌器(Torrington，CT)以22000rpm混合2分钟。在料水比1:12条件下，用盐酸调pH值至5.0～5.5，控制温度用水解蛋白酶降解酒糟中的蛋白质，离心，将pH值调至中性，浓缩，用4倍体积95%乙醇沉淀，静置，过滤，冷冻干燥后待用。

郭波莉 2024-11-05 15:12:15

    量取2.0mL离心后的酶解物上清液，加入2.0mL的10%三氯乙酸（TCA）,混合均匀后离心（10000r/min,4℃,20min）,再取上清液2.0mL与3.0mL的双缩脲试剂混合均匀，在540nm波长条件下测量吸光值，利用四肽溶液标准曲线，算出上清液中的蛋白肽含量。

郭波莉 2024-11-05 15:12:15

    青稞酒糟多酚含量的测定 采用Folin-Ciocalteu法测定酚类物质的含量。吸取125μL样品溶液于试管中，加入500μL蒸馏水和125μL福林-酚，充分摇匀，反应6min后加入1.25mL 7g/100mL的Na2CO3溶液，再加入1mL蒸馏水，室温下避光放置1.5h，以甲醇代替样品提取液为空白调零，在波长765nm下测定吸光度，平行测定三次。以没食子酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线方程，根据标准曲线方程计算样品中酚含量。

郭波莉 2024-11-05 15:12:15

    使用高压平板膜设备对在最佳工艺条件下获得的酒糟多肽进行超滤。使用截留分子量为10、5和3 kDa的超滤膜对酒糟多肽进行超滤；依次获得四种馏分，即F1（分子量>10 kDa)）、F2(分子量:5-10 kDa)、F3(分子量:3-5 kDa)和F4(分子量:<3 kDa)，将产物真空冷冻干燥以备后用。

郭波莉 2024-11-05 11:36:38

    利用碱溶酸沉法提取 HBSG 中的蛋白，取适量 HBSG 粉于醇（95%乙醇）碱（0.5 mol/LNaOH）混合液（1:2）中，固液比1:40，磁力搅拌 390 min 后离心取上清。调节上清液 pH=4.7，静置 2 h 后取沉淀，水洗使蛋白 pH 为中性后冷冻干燥，得到粗蛋白粉末。将 HBSG 蛋白溶于蒸馏水中（1:30），调节 pH 为 10.0，加入碱性蛋白酶（1:25），水解 240 min，放置 90℃水浴锅中 15 min，离心 15 min(4000r/min，4℃)，取上清，冻干备用。